脂肪测定——索式提取法(经典方法)
点击次数:3488 更新时间:2022-03-21
实验概要
本文介绍了脂肪测定——索式提取法(经典方法)的原理、步骤及注意事项等。
实验原理
样品经前处理后,放入圆筒滤纸内,将滤纸筒置于索式提取管中,利用yimi或石油醚在水浴中加热回流,使样品中的脂肪进入溶剂中,回收溶剂后所得到的残留物,即为脂肪(粗脂肪)。采用这种方法测出游离态脂,此外还含有磷脂、色素、蜡状物、挥发油、糖脂等物质,所以用索氏提取法测得的脂肪为粗脂肪。
索氏提取法适用于脂类含量较高,结合态的脂类含量较少,能烘干磨细,不宜吸湿结块的样品的测定。此法只能测定游离态脂肪,而结合态脂肪无法测出,要想测出结合态脂肪需在一定条件下水解后变成为游离态的脂肪方能测出。另外此法是经典方法,对大多数样品结果比较可靠,但需要周期长,溶剂量大。
实验步骤
1. 滤纸筒的制备
将滤纸剪成长方形8×375px ,卷成圆筒,直径为150px,将圆筒底部封好,最好放一些脱脂棉,避免向外漏样。
2. 称取样品,将样品烘干磨细,称取一定量与纸筒封好上口,最好用测定水的样品。
3. 索式抽提器的准备
索氏抽提器由三部分组成,回流冷凝管、提取管、提脂瓶组成。提脂瓶在使用前需烘干并称至恒重。其它要干燥。
4. 抽提
将装好样的纸筒放入抽提管 , 倒入yimi的量从提取管加入,加入的量为提取瓶体积的2/3 接上冷凝装置,在恒温水浴中抽提,水浴温度大约为55℃左右,可用滤纸检验,理论值抽提6-8小时,实际值3-4小时,但也根据样品性质来决定。
5. 回收yimi
当yimi在提取管内即将虹吸时立即取下提取管,将其下口放到yimi回收瓶内,使之倾斜,然后将提取瓶放到100-150℃烘箱烘至恒重。
6. 计算
脂肪%= (W2-W1)/W x 100
W2——瓶和样品重(g)W1——瓶子重量(g) W——样品重量(g)
滤纸筒应事先放入烧杯与100-105℃烘箱烘至恒重。
注意事项
1. 样品应干燥后研细,装样品的滤纸筒一定要紧密,不能往外漏样品,否则重做。
2. 放入滤纸筒的高度不能超过回流弯管,否则yimi不易穿透样品,使脂肪不能全部提出,造成误差。
3. 碰到含多糖及糊精的样品要先以冷水处理,等其干燥后连同滤纸一起放入提取器内。
4. 提取时水浴温度不能过高,一般使yimi刚开始沸腾即可(约45℃左右),回流速度以8-12次/时为宜。
5 所用yimi必需是无水yimi,如含有水分则可能将样品中的糖以及无机物抽出,造成误差。
6. 若用干样品测定脂肪,可按下式计算原来样品脂肪的含量
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